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一、直接測定法:薄層色譜硅膠板在色譜分離后,直接用肉眼觀察比較或用儀器掃描斑點而測定其含量。
a.目測法樣品經色譜分離后,直接觀察所得斑點的大小和顏色的深淺,并與標準品在相同條件下展開所得到的一系列已知不同濃度的標準斑點相比較,而近似地判斷樣品中所測成分的含量。
b.測面積法展開后色譜上的斑點面積與化合物含量間,符合一定的線性關系。
c.儀器測定法:用光密度計或稱薄層掃描儀(TLC Scanner)掃描定量,該方法已成為薄層定量的主要方法。主要包括:吸收測定法,熒光測定法,熒光淬滅法。
二、洗脫測定法:
1.斑點的定位
2.斑點的洗脫:用吸集器將斑點位置的吸附吸下,然后用洗脫溶劑洗脫。
3.測定:
a.紫外分光光度法:洗脫液調整至一定體積,在此化合物最大吸收波長處測定。同時把樣品斑點相應位置薄層吸附劑同樣取下做空白對照。
b.比色法:選擇靈敏度高、專屬性好的比色反應測定化合物含量,是比較常用的方法。
c.其它方法:極譜、庫侖滴定、熒光測定等。
三、特殊的薄層
1.高效薄層色譜:是在普通薄層基礎上發展起來的一種更為靈敏、精細的薄層技術。高效薄層是采用小顆粒吸附劑制備的均勻薄層,分離效率比普通薄層提高三倍,檢出靈敏度增加,分析時間縮短。
2.棒狀薄層色譜:將樣品點在薄層棒上,經點樣、展開后將被分離后的色譜棒通過適當的機械傳動裝置,水平地穿過檢測氫火焰的中心,使化合物燃燒裂解,形成離子碎片和自由電子,再由電極收集它們并產生與化合物量成正比的電流信號而測出各物質的含量。
3.超薄層色譜:經四氯烷基硅(鍵合鉛)制成整塊硅膠板,而不用顆粒狀吸附劑。厚度10μm,有孔徑為1~2μm的大孔,孔徑為3~4nm的中孔。UTLC取代了玻璃板,不需要載體;展程1~3cm,縮短分析時間,節約展開劑;具有高分離效率和選擇性。可用于分離藥物、酚類、增塑劑、甾族化合物等。
煙臺維啟化工產品有限公司,主要從事層析耗材的生產及銷售,產品包括,柱層層析硅膠粉、薄層色譜硅膠板、薄層色譜硅膠制備板等,經過近10年的摸索,我們生產的硅膠粉無論在產能還是質量方面都一直處于國內領先水平,并且在客戶中享有極高的聲譽。