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薄層色譜硅膠板點樣注意的問題:
1.樣品(pin)的溶(rong)劑:樣品(pin)在(zai)溶(rong)劑中溶(rong)解度很大,原點(dian)將變成空(kong)心圓,影響隨后的線性展開(kai),所以(yi)(yi)原則上(shang)應選擇對被測成分可以(yi)(yi)溶(rong)解但溶(rong)解度不是很大的溶(rong)劑。
供試液的溶劑在原點殘留會改變展開的選擇性,親水(shui)性溶劑殘留在原點吸收大氣中的水(shui)分(特別(bie)在高(gao)濕(shi)度(du)環境)對色譜(pu)質量也會產生影響,因此除去原點殘存溶劑是必要的,但對遇熱(re)不穩定(ding)和易揮發的成分,應避免高(gao)溫加(jia)熱(re),以免成分被(bei)破壞或損(sun)失。
2.點(dian)樣量:原點(dian)位置對樣品容積的負荷量有限,體(ti)積不宜太大(da),一般為 0.5~10μl,樣品的濃度(du)通(tong)常為0.5~2mg,太濃時展開(kai)劑從原點(dian)外圍繞行而不是通(tong)過整個(ge)原點(dian)把它帶動向前(qian),使斑點(dian)脫尾(wei)或重(zhong)疊,降低分離效(xiao)率(lv)。
點(dian)樣(yang)量(liang)太(tai)小,不能(neng)檢出清晰(xi)的斑點(dian)影響判斷。點(dian)樣(yang)量(liang)太(tai)多(duo),展開劑不能(neng)全部負載(zai),容(rong)易產生(sheng)脫尾現(xian)象(xiang)。當點(dian)樣(yang)量(liang)適合時(shi),可采(cai)用(yong)點(dian)狀點(dian)樣(yang);當點(dian)樣(yang)量(liang)過大,原點(dian)無法負荷時(shi),可采(cai)用(yong)條帶(dai)狀點(dian)樣(yang),得到(dao)更好的分(fen)(fen)離(li)效果,提高分(fen)(fen)辨率。