薄層色譜硅膠制備板的基本原理：把吸附劑（固定相）均勻地鋪在一塊玻璃板上，將待分離的樣品溶液點加在一薄層板的一端，在密閉的容器中用適當的溶劑（流動相）展開，由于吸附劑對不同物質的吸附力大小不同及溶劑對不同物質溶解分配系數不同，當溶劑流過時，各物質在吸附劑和溶劑之間發生連續不斷地吸附，解吸附，再吸附，再解吸附。

不易(yi)被吸附或(huo)易(yi)被溶(rong)劑(ji)溶(rong)解的(de)物質(zhi)相對移動得快一些。經過一段時間的(de)展開，不同的(de)物質(zhi)被彼(bi)此分(fen)開，最(zui)后形成相互分(fen)離(li)的(de)斑點(dian)。將展開完畢的(de)薄層板(ban)從密閉容器(qi)中取出(chu)后，應用特定(ding)的(de)試藥或(huo)方(fang)法將斑點(dian)顯色，從而達到定(ding)性和定(ding)量的(de)目(mu)的(de)。

薄層板的(de)使用：

1.點樣

將樣(yang)品溶于適(shi)當的(de)(de)溶劑(ji)中，取微量(liang)注射器或玻璃毛細(xi)管截齊后(hou)(hou)，吸取一(yi)定(ding)量(liang)的(de)(de)檢樣(yang)，輕輕接觸到薄層(ceng)(ceng)上(shang)，使樣(yang)品自動吸到薄層(ceng)(ceng)上(shang)，點(dian)(dian)的(de)(de)直徑不要超過(guo)0.3厘(li)(li)米(mi)，一(yi)次不能點(dian)(dian)完，待干(gan)后(hou)(hou)再點(dian)(dian)，稍(shao)有過(guo)分就會損(sun)傷(shang)板(ban)面，影響(xiang)展開后(hou)(hou)的(de)(de)斑點(dian)(dian)形狀。每(mei)兩個樣(yang)點(dian)(dian)之間相(xiang)距(ju)(ju)至(zhi)少1.5厘(li)(li)米(mi)。點(dian)(dian)樣(yang)的(de)(de)起點(dian)(dian)距(ju)(ju)薄板(ban)底(di)(di)邊至(zhi)少1.5厘(li)(li)米(mi)，以免樣(yang)點(dian)(dian)浸(jin)入展開溶劑(ji)中，同塊薄板(ban)上(shang)各(ge)樣(yang)點(dian)(dian)應(ying)保持在(zai)與(yu)底(di)(di)邊平行的(de)(de)一(yi)條(tiao)直線上(shang)，為控制好點(dian)(dian)樣(yang)距(ju)(ju)離，應(ying)用薄層(ceng)(ceng)點(dian)(dian)樣(yang)尺架(jia)。

2.展開

根據薄層(ceng)(ceng)板大小(xiao)，自行選(xuan)用適當玻璃(li)標本(ben)缸，長方形，如(ru)17×10×6厘米(mi)的(de)標本(ben)缸可容納下15×9厘米(mi)的(de)玻璃(li)板。采用較大的(de)玻璃(li)缸和(he)玻璃(li)板時(shi)，在缸內(nei)沿周圍缸壁襯一(yi)(yi)層(ceng)(ceng)預先浸有溶劑的(de)濾紙，以便缸內(nei)展開溶劑易達到飽和(he)，防止邊緣效應(ying)和(he)同一(yi)(yi)物(wu)質(zhi)Rf值不一(yi)(yi)致(zhi)現(xian)象(xiang)。

一般將薄(bo)層(ceng)(ceng)板(ban)斜(xie)置展(zhan)開(kai)(kai)(kai)(kai)容器(qi)內，密(mi)閉。先(xian)不使溶(rong)劑(ji)(ji)(ji)浸(jin)濕薄(bo)層(ceng)(ceng)板(ban)，飽(bao)和(he)10~15分鐘后再進行(xing)展(zhan)開(kai)(kai)(kai)(kai)，展(zhan)開(kai)(kai)(kai)(kai)溶(rong)劑(ji)(ji)(ji)沿著薄(bo)層(ceng)(ceng)板(ban)向上(shang)移動。對(dui)加粘(zhan)(zhan)合劑(ji)(ji)(ji)的(de)(de)(de)涂板(ban)可(ke)以近(jin)于(yu)垂(chui)直的(de)(de)(de)狀態(tai)進行(xing)展(zhan)開(kai)(kai)(kai)(kai)，而對(dui)未加粘(zhan)(zhan)合劑(ji)(ji)(ji)的(de)(de)(de)薄(bo)層(ceng)(ceng)板(ban)則(ze)必須以傾斜(xie)狀態(tai)（15度(du)角）進行(xing)展(zhan)開(kai)(kai)(kai)(kai)。為了防(fang)止產生“邊(bian)(bian)緣效(xiao)應”和(he)展(zhan)開(kai)(kai)(kai)(kai)溶(rong)劑(ji)(ji)(ji)不飽(bao)和(he)現象(xiang)。還可(ke)采用夾(jia)心式展(zhan)開(kai)(kai)(kai)(kai)容器(qi)，其方法是將薄(bo)層(ceng)(ceng)板(ban)的(de)(de)(de)左右兩(liang)側各刮去5~10毫(hao)米(mi)，墊(dian)上(shang)條狀玻璃或塑料，蓋一塊與薄(bo)層(ceng)(ceng)板(ban)同(tong)樣大小的(de)(de)(de)玻璃，用夾(jia)子將兩(liang)邊(bian)(bian)夾(jia)好，插入展(zhan)開(kai)(kai)(kai)(kai)溶(rong)劑(ji)(ji)(ji)中(zhong)進行(xing)展(zhan)開(kai)(kai)(kai)(kai)，并能(neng)取得(de)良(liang)好效(xiao)果。

3.顯色

薄層展開后，涼干。如含粘合劑，即可直接噴顯色劑，使之顯色，有的還需經紫外線（254nm）照射后方能顯色；對不含粘合劑的薄板，在噴顯色劑時應盡量遠離薄層色譜硅膠板，否則會連吸附劑一起吹掉，應予以注意。