薄層色譜硅膠板點樣的注意事項

發布日期：2016-07-27 作者：點擊：

一、薄層色譜硅膠板點樣方式：分為手動點樣和自動點樣。手動點樣主要器具為微量毛細管、微量注射器等。自動點樣采用半自動點樣儀或全自動點樣儀，按預設程序自動點樣。手動點樣靈活方便，器具以微量毛細管最常用。儀器的自動點樣準確性好，常用于薄層掃描法的含量測定。

薄層色譜硅膠板

二、點樣方法：分為接觸式點樣和噴霧點樣。噴霧點樣為儀器控制。接觸式手工點樣時，應注意小心用點樣器垂直接觸薄層板表面以防止損傷板面。若薄層吸附劑表面被損壞或點成洼孔，則展開后斑點成不規則形狀: 靠近溶劑前沿的化合物形成三角形，靠近原點的化合物形成新月形，影響測定結果。原點損失帶來誤差，也將使展開后的定量和判斷不準確。

三點樣注意事項

1.點樣量：原點位置對樣品容積的負荷量有限，體積不宜太大，一般為0.5～10μl，樣品的濃度通常為0.5～2 mg，太濃時展開劑從原點外圍繞行而不是通過整個原點把它帶動向前，使斑點拖尾或重疊，降低分離效率。點樣量太小，不能檢出清晰的斑點影響判斷。點樣量太多，展開劑不能全部負載，容易產生拖尾現象。當點樣量適合時，可采用點狀點樣。當點樣量過大，原點無法負荷時，可采用條帶狀點樣，得到更好的分離效果，提高分辨率。

2.樣品的溶劑：樣品在溶劑中溶解度很大，原點將變成空心圓，影響隨后的線性展開，所以原則上應選擇對被測成分可以溶解但溶解度不是很大的溶劑。供試液的溶劑在原點殘留會改變展開的選擇性，親水性溶劑殘留在原點吸收大氣中的水分對色譜質量也會產生影響，因此除去原點殘存溶劑是必要的，但對遇熱不穩定和易揮發的成分，應避免高溫加熱，以免成分被破壞或損失。

3.點樣的手法：接觸式點樣直徑通常在3mm以內，采用邊點樣邊用吹風機吹干溶劑的方式。在同一原點進行多次點樣時，要盡可能使每次的點樣環中心重合、直徑大小一致，以免形成多個環狀，在原點的不均勻分布將使展開后的色譜圖帶不夠清晰和整齊。

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