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薄層層析(xi)硅膠(jiao)板色(se)(se)譜(pu)(pu)柱是(shi)高(gao)效(xiao)液(ye)相色(se)(se)譜(pu)(pu)儀最主(zhu)要(yao)的(de)(de)部件(jian),柱效(xiao)的(de)(de)好壞(huai)直接影響(xiang)目標化合物的(de)(de)分析(xi)和(he)檢測。但在高(gao)效(xiao)液(ye)相色(se)(se)譜(pu)(pu)分析(xi)中,容易發生(sheng)柱堵塞(sai)引起(qi)系統壓(ya)力過高(gao)、柱效(xiao)低(di)引起(qi)峰拖尾(wei)和(he)變寬、柱污染(ran)和(he)損壞(huai)導致(zhi)鬼(gui)峰等問題(ti),出現這些問題(ti)的(de)(de)內在原因有硅羥基的(de)(de)死吸附、重金屬(shu)的(de)(de)存在、碳流失(shi)、緩(huan)沖(chong)液(ye)中鹽的(de)(de)析(xi)出和(he)色(se)(se)譜(pu)(pu)柱變干等。
由于薄層層析(xi)硅(gui)膠(jiao)板色(se)譜柱的基材硅(gui)膠(jiao)粒(li)子表面存在硅(gui)膠(jiao)羥基,樣品組(zu)(zu)分既在流動相與固定相之間(jian)(jian)進行(xing)分配(pei)(pei),又在流動相與硅(gui)羥基之間(jian)(jian)進行(xing)分配(pei)(pei),即(ji)存在雙分配(pei)(pei)效應。樣品組(zu)(zu)分被硅(gui)羥基吸(xi)(xi)附(fu)稱為死吸(xi)(xi)附(fu)或非特(te)異性吸(xi)(xi)附(fu)。當硅(gui)羥基對樣品組(zu)(zu)分的吸(xi)(xi)附(fu)趨(qu)近(jin)于飽和時,柱效下(xia)降,會(hui)導致峰拖尾和變寬。
薄層(ceng)層(ceng)析硅(gui)膠(jiao)板色(se)譜柱(zhu)的基材硅(gui)膠(jiao)粒子無論純度多高,無論怎樣處理,都會有重(zhong)金(jin)屬以(yi)金(jin)屬氧(yang)(yang)化物(wu)的形式(shi)殘存在硅(gui)膠(jiao)粒子表面(mian)。這(zhe)些金(jin)屬氧(yang)(yang)化物(wu)很(hen)容(rong)易(yi)與其它化合物(wu)形成螯(ao)合物(wu),使其被氧(yang)(yang)化,產生不對稱峰或(huo)拖(tuo)尾峰。固(gu)定相(xiang)長(chang)期(qi)使用后(hou),會有部分碳鏈被流(liu)動相(xiang)洗脫下來,隨(sui)流(liu)動相(xiang)一起流(liu)出色(se)譜柱(zhu),造成碳流(liu)失(shi)。
薄層層析硅(gui)膠(jiao)板色譜分(fen)析時,有(you)時流(liu)動(dong)相中會含有(you)緩沖(chong)鹽(yan)溶(rong)液(ye)。分(fen)析結束后,如(ru)果(guo)(guo)沒先用含一定配比(bi)的水相流(liu)動(dong)相沖(chong)洗,而直接用純有(you)機(ji)相沖(chong)洗,瞬(shun)間柱(zhu)(zhu)(zhu)(zhu)子(zi)的微環境中有(you)機(ji)相高,水相低。這時,流(liu)動(dong)相中的緩沖(chong)鹽(yan)溶(rong)液(ye)極易析出鹽(yan),將(jiang)柱(zhu)(zhu)(zhu)(zhu)子(zi)堵(du)塞,使柱(zhu)(zhu)(zhu)(zhu)壓升(sheng)高,柱(zhu)(zhu)(zhu)(zhu)效(xiao)下(xia)降(jiang)。如(ru)果(guo)(guo)色譜柱(zhu)(zhu)(zhu)(zhu)保(bao)存不當,使色譜柱(zhu)(zhu)(zhu)(zhu)中的保(bao)存液(ye)全部揮(hui)發掉,柱(zhu)(zhu)(zhu)(zhu)子(zi)內部變(bian)干(gan),會損傷色譜柱(zhu)(zhu)(zhu)(zhu),影響(xiang)分(fen)離效(xiao)果(guo)(guo)。