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薄層色譜硅膠制備板點樣應注意的問題

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薄層色譜硅膠制備板點樣應注意的問題

發布日期:2018-03-08 作者: 點擊:

薄層色譜硅膠制備板


薄層色譜硅膠制備板點樣應注意的問題:


(1)點樣量:原點位置對樣品容積的負荷量有限,體積不宜太大,一般為 0.5~10μl,樣品的濃度通常為0.5~2mg,太濃時展開劑從原點外圍繞行而不是通過整個原點把它帶動向前,使斑點脫尾或重疊,降低分離效率。點樣量太小,不能檢出清晰的斑點影響判斷。點樣量太多,展開劑不能全部負載,容易產生脫尾現象。當點樣量適合時,可采用點狀點樣;當點樣量過大,原點無法負荷時,可采用條帶狀點樣,得到更好的分離效果,提高分辨率。


(2)樣品的溶劑:樣品在溶劑中溶解度很大,原點將變成空心圓,影響隨后的線性展開,所以原則上應選擇對被測成分可以溶解但溶解度不是很大的溶劑。供試液的溶劑在原點殘留會改變展開的選擇性,親水性溶劑殘留在原點吸收大氣中的水分(特別在高濕度環境)對色譜質量也會產生影響,因此除去原點殘存溶劑是必要的,但對遇熱不穩定和易揮發的成分,應避免高溫加熱,以免成分被破壞或損失。


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